包蟲(chóng)IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：包蟲(chóng)IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規格】 
48人份／盒，96人份／盒
【預期用途】
本試劑盒用于體外定性檢測人血清樣品中的包蟲(chóng)IgG抗體。
本品系用包蟲(chóng)抗原包被的微孔板和酶標記抗人IgG單克隆抗體及其他試劑制成，用于包蟲(chóng)病的臨床輔助診斷。
包蟲(chóng)病是棘球蚴?。‥chinococosis）的俗稱(chēng)，是由棘球絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)寄生于人體引起的一種人獸共患寄生蟲(chóng)病。引起包蟲(chóng)病的病原主要有：細粒棘球絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)引起囊型包蟲(chóng)??；多房棘球絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)引起泡型包蟲(chóng)病。家犬和狼、豺、狐等食肉動(dòng)物是棘球蚴絳蟲(chóng)的傳染源，但家犬是主要傳染源。作為終宿主的家犬排出成熟節片及大量蟲(chóng)卵時(shí)，污染草地、水源、家居環(huán)境，食草動(dòng)物和人均因食入蟲(chóng)卵而被感染。包蟲(chóng)病患者早期可無(wú)任何臨床癥狀，多在體檢中被發(fā)現。主要的臨床表現為棘球蚴囊占位所致壓迫、刺激、或破裂引起的一系列癥狀。包蟲(chóng)病可發(fā)生在全身多個(gè)臟器，以肝、肺多見(jiàn)，泡型包蟲(chóng)病對臟器的危害大于囊型包蟲(chóng)病，因其可通過(guò)外生性增殖向周?chē)M織浸潤、擴散，也可通過(guò)淋巴或血液擴散到其它臟器，猶如惡性腫瘤，就診病人多屬晚期。
包蟲(chóng)病患者的血清中含有特異性包蟲(chóng)IgG抗體或循環(huán)抗原或免疫復合物，檢測人血清樣品中的包蟲(chóng)IgG抗體，可用于包蟲(chóng)病的輔助診斷。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫間接法原理：用包蟲(chóng)抗原包被微孔板，加待檢者血清到板孔中，包蟲(chóng)IgG抗體特異性地與微孔板表面的包蟲(chóng)抗原結合，形成抗原抗體免疫復合物。洗板，除去多余物質(zhì)后，加入抗人IgG抗體酶標記物，形成（抗原－抗體－二抗酶標記物）免疫復合物。洗板，除去多余的結合物，加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應的強弱即可定性檢測待檢樣品中的包蟲(chóng)IgG抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒包含的組份
序號 組份名稱(chēng) 主要成分 使用方法 裝量
    96人份／盒 48人份／盒
1 預包被包蟲(chóng)抗原的微孔板 微孔板中預包被包蟲(chóng)天然抗原。 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗體酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的抗人IgG單克隆抗體（來(lái)源于小鼠）；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 包蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性對照 包蟲(chóng)IgG陽(yáng)性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 包蟲(chóng)IgG抗體陰性對照 包蟲(chóng)IgG陰性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 包蟲(chóng)IgG抗體臨界對照 包蟲(chóng)IgG陽(yáng)性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過(guò)氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液 磷酸鹽緩沖液，含0.5%Tween-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液（IgG） 硼酸鹽緩沖液，甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
12 封板膜   4片 4片
13 記錄紙   1份 1份
注：酶標記物、陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
微孔板清洗器
(5～40)μL、(40～200)μL、200μL～1mL移液器
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)標簽。
拆封后未用完的微孔板應放入密封袋內2℃～8℃保存。各組份拆封后應在一個(gè)月內用完。
【適用儀器】
具有450nm、630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣品要求】
應按照臨床采血技術(shù)規范操作采集血清。室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)；若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下，并盡量避免反復凍融，凍融次數不宜超過(guò)5次。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本試劑盒檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，仍應避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1.  試驗過(guò)程注意事項
1.1  試劑盒各組份從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫（20℃～25℃）平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2  在儲存及溫育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3  為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4  在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5  嚴格遵守規定的溫育時(shí)間和溫度。如果第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預溫育”時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。
1.6  洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內均無(wú)洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2.  試驗準備
2.1  試劑盒反應試劑準備
2.1.1  微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2  洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3  其它液體組份
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2  樣品準備
樣品1:100稀釋?zhuān)喝?0L待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgG）的小試管內，充分混勻。
3．  檢測過(guò)程
3.1  每次實(shí)驗每板須設空白孔（若以雙波長(cháng)檢測不設空白孔）、陽(yáng)性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100L。置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.2  甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.3  甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4  單波長(cháng)檢測：以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值；
雙波長(cháng)檢測：用酶標儀讀取450nm和630nm處的A值，以A450nm－A630nm計算A值。
4.  參考范圍
陰性對照A值≤0.15，0.20≤臨界對照A值平均值≤0.80，臨界對照A值平均值／陰性對照A值平均值≥2.0，陽(yáng)性對照A值＞臨界對照A值平均值，證明實(shí)驗成立，否則試驗結果無(wú)效，需重新試驗。
5.  結果判定
計算S/CO值，S/CO=樣品A值／臨界對照A值平均值。
反應性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
陰性（N）：S/CO≤0.9
【檢驗結果的解釋】
1.  結果為反應性提示包蟲(chóng)感染，對反應性或可疑結果建議進(jìn)行影像學(xué)檢查。 
2.  檢測結果僅供臨床參考，臨床醫生應結合病史、癥狀及影像學(xué)檢測結果做出診斷。
【檢驗方法的局限性】
1.  樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導致錯誤結果。
2.  研究顯示本品與弓形蟲(chóng)、肺吸蟲(chóng)、旋毛蟲(chóng)、血吸蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應；與部分囊蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性血清有交叉反應，應結合病史、癥狀、影像學(xué)檢測結果及流行病學(xué)調查加以甄別；與其它病原體的交叉反應尚無(wú)實(shí)驗數據。
【產(chǎn)品性能指標】
1.  靈敏度、特異性
本品檢測1080例包蟲(chóng)病流行區和非流行區人群樣本，與影像學(xué)檢測比較，其靈敏度為91.0%，特異度為94.7%。
2.  精密性
批內變異系數CV（%）不高于15%（n＝10）。
3.  交叉反應
與弓形蟲(chóng)、肺吸蟲(chóng)、旋毛蟲(chóng)、血吸蟲(chóng)等病原體的IgG抗體陽(yáng)性血清未發(fā)現交叉反應；與部分囊蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性血清有交叉反應。
與甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類(lèi)免疫缺陷病毒HIV（1/2型）陽(yáng)性血清、肝癌患者、肝囊腫患者、細菌性肝膿腫患者、膽囊積液患者、肺結核患者血清無(wú)交叉反應。
4.  內源性物質(zhì)干擾試驗
樣品中膽紅素0.1~0.4 mg/mL、血紅蛋白5~50 mg/mL、甘油三酯2~8 mg/mL濃度范圍內對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
5.  對國家參考品檢測能力
本品檢測國家參考品（230029-201001），8份陰性參考品檢測結果全部為陰性；8份陽(yáng)性參考品檢測結果全部為陽(yáng)性；精密性≤15％（n=10）；最低檢出量不高于1：16，均符合國家參考品標準規定。
【注意事項】
1.  本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2.  用于制備本品陰性對照、陽(yáng)性對照、臨界對照的血清已經(jīng)HBsAg、HCV抗體、梅毒螺旋體抗體和HIV抗體檢測為陰性，試劑盒內其它各種組份均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測各組份所有的傳染性因素，因此本品應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
3.  任何臨床樣品都應作為具有傳染性樣品對待。
4.  待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應予以消毒。
5.  注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用
【參考文獻】
 [1] 中華人民共和國衛生行業(yè)標準（WS257-2006）“包蟲(chóng)病診斷標準”。
【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
聯(lián)系方式：
售后服務(wù)單位名稱(chēng)：
聯(lián)系方式：
生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號： 
【醫療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】
【說(shuō)明書(shū)核準及修改日期】