麻疹病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
中文名稱(chēng)：麻疹病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）
【包裝規格】
48人份／盒、96人份／盒。
【預期用途】
定性檢測人血清或血漿樣本中的麻疹病毒IgM抗體。
用于麻疹病毒感染的輔助診斷。
麻疹是由麻疹病毒（measles virus，MV）引起的一種以發(fā)熱、呼吸道卡他癥狀和全身斑丘為特征的急性病毒性傳染病。在麻疹疫苗應用之前，麻疹呈世界性分布，曾經(jīng)是嚴重危害兒童生命健康的傳染病之一。
自從1965年我國開(kāi)始應用麻疹疫苗，特別是1984年開(kāi)展強化計劃免疫工作之后，我國麻疹發(fā)病率急劇下降，年發(fā)病率在10/10萬(wàn)以下，但是近幾年隨著(zhù)流動(dòng)人口逐漸增加，有些兒童得不到有效的預防接種，致使麻疹仍是兒童最常見(jiàn)的病毒感染性疾病。發(fā)病率每年在5～10萬(wàn)[1]，估計實(shí)際發(fā)病率高于報告發(fā)病率，距離世界衛生組織提出的控制乃至消除麻疹的目標還有很大距離?，F有疫苗不能達到終生保護[2]，而且麻疹為呼吸道傳播，傳染性強。
目前，我國人口的流動(dòng)性大，當易感人群累計到一定程度就可能引起麻疹的爆發(fā)和流行。并且，由于麻疹疫苗的廣泛使用，接觸野毒株的機會(huì )少，體內抗體水平逐年減少，最終可能導致不能完全抵御麻疹病毒的侵襲，出現不典型的臨床表現[3]。其臨床癥狀很難與風(fēng)疹、人類(lèi)細小DNA病毒B19、人單純皰疹6型、柯薩奇病毒、?？刹《竞偷歉餆岣腥鞠鄥^別。癥狀典型的麻疹可根據臨床表現結合流行病學(xué)狀況做出診斷，而癥狀不典型的病人需根據血清麻疹抗體的檢測或麻疹病毒的分離陽(yáng)性做出診斷。因此，提高和改進(jìn)麻疹病毒實(shí)驗室檢測技術(shù)，從而，正確、快速診斷麻疹，及時(shí)掌握麻疹疫情顯得尤為重要。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫捕獲法原理：用抗人IgM-μ鏈單克隆抗體包被微孔板，加待檢血清或血漿到板孔中，樣品中所含的IgM抗體與微孔板上的抗人IgM-μ鏈抗體結合，形成抗體－二抗復合物。洗板后加入麻疹病毒抗原酶標記物，形成（抗體－二抗－抗原酶標記物）免疫復合物，洗板后加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應的強弱即可定性檢測待檢樣品中的麻疹病毒IgM抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒中包含的組分：
序號 組分名稱(chēng) 主要成分 使用方法 裝量
    96人份/盒 48人份/盒
1 預包被抗人IgM-μ鏈抗體的微孔板 微孔板中預包被小鼠抗人IgM-μ鏈單克隆抗體。 直接使用，可拆成單孔使用 96孔 48孔
2 麻疹病毒抗原酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的麻疹病毒抗原；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、蛋白穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 麻疹病毒IgM抗體陽(yáng)性對照 麻疹病毒IgM抗體陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 麻疹病毒IgM抗體陰性對照 麻疹病毒IgM抗體陰性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
5 顯色液A 檸檬酸、過(guò)氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
6 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 濃縮洗滌液（10倍） 磷酸鹽緩沖液，含0.5%吐溫-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
8 樣品稀釋液（IgM） 硼酸鹽緩沖液，含甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
9 終止液 0.5 mol/L 硫酸溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
10 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
11 封板膜   4片 4片
12 記錄紙   1份 1份
注：酶標記物、陽(yáng)性對照、陰性對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。樣品稀釋液（IgM）可用于本公司IgM抗體檢測系列的ELISA試劑盒。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可以用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
蒸餾水或去離子水
微孔板清洗器
10μL～100μL、1mL移液器與一次性吸嘴
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
酶標儀
60分鐘或更長(cháng)時(shí)程的計時(shí)器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
拆封后未用完的微孔板應放入密封袋內2℃～8℃保存。液體組分應擰緊瓶蓋2～8℃保存。各組分拆封后應在一個(gè)月內用完。
生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)標簽。
【適用儀器】
具有450nm和630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣本要求】
應按照臨床采血技術(shù)規范操作采集血清或血漿樣品。室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)；若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下，并避免反復凍融。本試驗可用于含乙二胺四乙酸（EDTA）、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽抗凝劑樣本的檢測，但含其它種類(lèi)抗凝劑的樣本能否用于本試驗尚無(wú)實(shí)驗數據。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本試劑盒檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，仍應避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1. 試驗過(guò)程注意事項  
1.1 試劑盒各組分從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2 在儲存及孵育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3 為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4 在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5 嚴格遵守規定的孵育時(shí)間和溫度。如果第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預孵育”時(shí)間，從而影響測量值的準確性及重復性。
1.6 洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內均無(wú)洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2. 試驗準備
2.1 試劑盒反應試劑準備
2.1.1 微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2 洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3 其它液體組分
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2 樣品準備
樣品1:100稀釋?zhuān)喝?0μL待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgM）的小試管內，充分混勻。
3. 檢測過(guò)程
3.1 每次實(shí)驗每板須設空白孔、陽(yáng)性對照各1孔，陰性對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照直接使用，100μL/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100μL。置37℃孵育60分鐘。
3.2 甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃孵育60分鐘。
3.3 甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃避光10～15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4 以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值；或以雙波長(cháng)（A450nm－A630nm）計算A值。
4. 質(zhì)量控制
陰性對照值介于0.0～0.15，陽(yáng)性對照值介于0.3～1.8，證明實(shí)驗成立；否則試驗結果無(wú)效，需重新試驗。
【陽(yáng)性判斷值】
如陰性對照A值平均值＜0.07，按0.07計算；如陰性對照A值平均值≥0.07，則按實(shí)際值計算。
計算S/N值，S/N值≥2.1，則判為陽(yáng)性。S/N值＜2.1，判為陰性。
S/N值＝樣品A值÷陰性對照A值平均值
【檢驗結果的解釋】
1. 結果為陽(yáng)性提示麻疹病毒急性或近期感染，對陽(yáng)性和可疑結果建議1～2周后再次采樣檢測，動(dòng)態(tài)觀(guān)察抗體水平的變化。
2. 檢測結果僅供臨床參考，臨床醫生應結合病史、癥狀及其它檢測結果做出診斷。
【檢驗方法的局限性】
1. 樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導致錯誤結果。
2. 實(shí)驗結果表明本品與交叉反應項目中所列病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清及類(lèi)風(fēng)濕因子無(wú)交叉反應，但與其它交叉因子的交叉反應尚無(wú)實(shí)驗數據。

【產(chǎn)品性能指標】
1. 靈敏度、特異性
通過(guò)1178例臨床研究，本品與通過(guò)美國食品藥物管理局（FDA）認證的同類(lèi)進(jìn)口試劑比較，靈敏度為97.6%，特異度為89.0%。
2. 精密性
    批內變異系數CV%不高于15%（n＝10）。
3. 交叉反應
未發(fā)現本品與類(lèi)風(fēng)濕因子及以下病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清發(fā)生交叉反應：弓形蟲(chóng)、風(fēng)疹病毒、巨細胞病毒、單純皰疹Ⅰ型病毒、單純皰疹Ⅱ型病毒。
4. 干擾試驗
4.1 與樣品接觸的抗凝劑（EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽）對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.2 纖維蛋白原對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，因此本品可檢測人血清或血漿樣品。
【注意事項】
1. 本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2. 用于制備本試劑盒陰性對照、陽(yáng)性對照的血清或血漿已經(jīng)乙肝表面抗原（HbsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、梅毒螺旋體抗體和人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測為陰性，試劑盒內其它各種組分均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測各組分所有的傳染性因素，因此本試劑盒應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
3. 任何臨床樣品都應作為具有傳染性樣品對待。
4. 待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應予以消毒。
5. 注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用
【參考文獻】
[1] 吳霆,王少量,凌羅亞,等.控制麻疹的策略.中國計劃免疫, 1998, 4:56～59.
[2] 許文波,張禮壁,夏亭海,等.麻疹野病毒的分離及血清學(xué)的初步分析.中國計劃免疫, 1996, 2(2):4～7.
[3] Martin DB,Weiner LB, Nieburg PI, et al. Atypical Measles in Adolescents and Young Adults. Ann Intern Med, 90:877～881.
【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
傳真號碼：0756-3890848
售后服務(wù)單位名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號：粵食藥監械生產(chǎn)許20040941號
【醫療器械注冊證書(shū)編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】國械注準20163402560
【說(shuō)明書(shū)核準及修改日期】2016年12月29日