麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規格】
48人份／盒，96人份／盒。
【預期用途】
本產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清或血漿樣本中的麻疹病毒IgG抗體。
麻疹是由麻疹病毒（Measles Virus，MV）引起的一種以發(fā)熱、呼吸道卡他癥狀和全身斑丘為特征的急性病毒性傳染病。人類(lèi)對麻疹病毒普遍易感。該病直接由咳嗽、噴嚏等飛沫傳播或接觸污染物而傳染，該病潛伏期為9～11天（成人潛伏期可達3周），隨后出現發(fā)熱，咳嗽，鼻炎及結膜炎等前驅期癥狀（持續3～4天）。發(fā)熱24小時(shí)，癥狀加重。前驅期后第4～5天出現皮疹，癥狀達到高峰。單純麻疹很少致人死亡，并發(fā)癥是造成死亡的重要原因。最重要的并發(fā)癥有支氣管肺炎、中耳炎、腦炎、腸炎，95%的麻疹死亡由支氣管肺炎所致。目前采用的臨床或實(shí)驗室診斷方法主要有：血凝抑制試驗（HI）、間接血凝試驗（PHA）、凝膠沉淀試驗、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），目前酶聯(lián)免疫法產(chǎn)品在臨床上廣泛應用。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫間接法原理：用麻疹病毒抗原包被微孔板，加待檢者血清或血漿到板孔中，樣品中存在的麻疹病毒IgG抗體特異性地與微孔板表面的麻疹病毒抗原結合，形成抗原抗體免疫復合物。洗板，除去多余物質(zhì)后，加入抗人IgG抗體酶標記物，形成（抗原－抗體－二抗酶標記物）免疫復合物。洗板，除去多余的結合物，加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應的強弱即可定性檢測待檢樣品中的麻疹病毒IgG抗體。 
【主要組成成分】
1. 本試劑盒包含的組份：
編號 組份名稱(chēng) 主要成分 使用方法 裝量
    96人份／盒 48人份／盒
1 預包被麻疹病毒抗原的微孔板 微孔板中預包被麻疹病毒抗原，源于培養的天然病毒。 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗體酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的抗人IgG單克隆抗體（源于小鼠）；硼酸鹽緩沖液，含0.1% Proclin-300、0.002%苯酚紅、蛋白穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 麻疹病毒IgG抗體陽(yáng)性對照 麻疹病毒IgG抗體陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 麻疹病毒IgG抗體陰性對照 硼酸鹽緩沖液，含牛血清白蛋白。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 麻疹病毒IgG抗體臨界對照 麻疹病毒IgG抗體陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過(guò)氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液（10倍） 磷酸鹽緩沖液，含0.5%Tween-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液 硼酸鹽緩沖液，含牛血清白蛋白。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋 　 　 1個(gè) 1個(gè)
12 封板膜 　 　 4片 4片
13 記錄紙 　 　 1份 1份
注：酶標記物、陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
具有450nm、630nm波長(cháng)的酶標儀
微孔板清洗器
5μL～40μL、40μL～200μL、200μL～1mL移液器
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
拆封后未用完的微孔板應放入密封袋內2℃～8℃保存。各組份拆封后應在一個(gè)月內用完。
生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)標簽。
【適用儀器】
具有450nm、630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣本要求】
應按照臨床采血技術(shù)規范操作采集血清或血漿樣品。血漿樣品推薦使用EDTA-K2（1.5mg/mL）、檸檬酸鈉（3.2mg/mL）、草酸鈉（0.01mol/L）或肝素鈉（12.5IU/mL）的抗凝血漿。室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)；若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下，并避免反復凍融。盡管低于一定濃度的內源性物質(zhì)（膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯）對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，仍應避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1. 試驗過(guò)程注意事項
1.1 試劑盒各組份從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫（20℃～25℃）平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2 在儲存及孵育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3 為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4 在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5 嚴格遵守規定的孵育時(shí)間和溫度。如果第一孔與最后一孔加樣時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預孵育”時(shí)間，從而影響測量值的準確性及重復性。
1.6 洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，確保所有孔內均無(wú)殘留洗滌液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2. 試驗準備
2.1 試劑盒反應試劑準備
2.1.1 微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2 洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3 其它液體組份
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2 樣品準備
樣品1:101稀釋?zhuān)喝?L待檢樣品，加入至含有0.5mL樣品稀釋液的小試管內，充分混勻。
3. 檢測過(guò)程
3.1 每次實(shí)驗每板須設空白孔1孔（若以雙波長(cháng)檢測不設空白孔），陽(yáng)性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100L。置37℃±1℃孵育30分鐘。
3.2 甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃±1℃孵育30分鐘。
3.3 甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4 單波長(cháng)檢測：以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值；
雙波長(cháng)檢測：將酶標儀設置主波長(cháng)為450nm和參考波長(cháng)為630nm讀取A值。
4. 參考范圍
陰性對照A值＜0.10，臨界對照A值平均值≥0.20，陽(yáng)性對照A值≥0.80。
滿(mǎn)足以上條件，證明實(shí)驗成立，否則試驗結果無(wú)效，需重新試驗。 
5. 結果判定
    計算S/CO值，S/CO=樣品A值/臨界對照A值平均值。
反應性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
陰性（N）：S/CO≤0.9
【檢驗結果的解釋】
如IgG抗體陰性，說(shuō)明受檢者未感染或未能成功免疫接種。如果受檢者未發(fā)生急性麻疹病毒感染而IgG抗體呈反應性，則提示既往感染或免疫接種過(guò)麻疹疫苗。
【檢驗方法的局限性】
1. 本產(chǎn)品檢測結果僅供臨床參考，不應作為臨床診治的唯一依據，對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、流行病學(xué)、其他實(shí)驗室檢查（如病原學(xué)檢測）等信息綜合考慮。
2. 免疫功能受損或接受免疫抑制治療的患者，如人類(lèi)免疫缺陷病原體（HIV）感染患者或器官移植后接受免疫抑制治療的患者，其血清學(xué)抗體及抗體親合力檢測的參考價(jià)值有限，可能會(huì )導致錯誤的醫學(xué)解釋。
3. 在近幾個(gè)月內接受過(guò)輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽(yáng)性檢測結果的分析應慎重。
4. 人血清中的異嗜性抗體可能與試劑中的Ig結合干擾試驗結果，對于經(jīng)常接觸動(dòng)物或動(dòng)物血清制品的人群，應警惕可能出現的異常干擾結果。
5. 接受過(guò)小鼠單克隆抗體治療的患者樣本中，可能含有人抗小鼠抗體（human anti-mouse antibodies, HAMA）。若待測樣本中含有HAMA，會(huì )影響檢測結果的準確性。
6. 樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導致錯誤結果。
7. 實(shí)驗結果表明本品與交叉反應項目中所列病原體的IgG抗體陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應，但與其它病原體的交叉反應尚無(wú)實(shí)驗數據。
【產(chǎn)品性能指標】
1. 靈敏度、特異性
本品檢測1315例不同人群樣本，與國外商品化的同類(lèi)試劑比較，靈敏度為99.3%，特異度為99.3%。
2. 重復性和批間差
批內變異系數CV（%）不高于15%（n＝10）。
用3個(gè)批號試劑盒檢測同一份低值重復性參考品，3個(gè)批號試劑盒之間的批間變異系數CV（%）不高于30%（n＝30）。
3. 檢測限
    用檢測限參考品進(jìn)行檢測，不高于0.4IU/mL。
4. 干擾試驗
4.1 抗凝劑（EDTA –K2 1.5mg/mL、檸檬酸鈉3.2mg/mL、草酸鈉0.01mol/L、肝素鈉12.5IU/mL）對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.2 低于一定濃度的內源性物質(zhì)（膽紅素0.4mg/mL、血紅蛋白10mg/mL、甘油三酯20mg/mL）和抗核抗體、類(lèi)風(fēng)濕因子對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.3 纖維蛋白原對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，因此本品可以檢測人血清或血漿樣品。
4.4 本品與風(fēng)疹病毒IgG抗體、腮腺炎病毒IgG抗體、白喉IgG抗體、百日咳IgG抗體、破傷風(fēng)IgG抗體、乙型肝炎表面抗體、流行性乙型腦炎IgG抗體、甲型肝炎IgG抗體、流行性腦脊髓膜炎IgG抗體、柯薩奇病毒IgG抗體、合胞病毒IgG抗體、肺炎支原體、腺病毒IgG抗體、EB病毒IgG抗體未見(jiàn)交叉反應。
5. 鉤狀（HOOK）效應
    本品無(wú)鉤狀效應。
【注意事項】
1. 本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2. 用于制備本品陰性對照、陽(yáng)性對照、臨界對照的血清或血漿已經(jīng)HBsAg、HCV抗體、梅毒螺旋體抗體和HIV抗體檢測為陰性，試劑盒內其它各種組份均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測各組份所有的傳染性因素，因此本試劑盒應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
3. 任何臨床樣品都應作為具有傳染性樣品對待。
4. 待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應予以消毒。
5. 注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用
【參考文獻】
[1] Beckford AP, Kaschula RO, Stephen C. Factors associated with fatal cases of measles: a retrospective autopsy study. S Afr Med J, 1985, 68:858~863.
【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
傳真號碼：0756-3890848
售后服務(wù)單位名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號：粵食藥監械生產(chǎn)許20040941號 
【醫療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】國械注準20153401259
【說(shuō)明書(shū)核準日期及修改日期】2020年8月3日